否定祈使句主要用於表達命令或請求某人不要做某事。其基本結構通常是在肯定祈使句前加上「Don't」，形成「Don't + 動詞原形」的形式。以下是詳細介紹：
對於以「be」開頭的肯定祈使句，其否定形式為「Don't + be + 其他成分」，如「Don't be late」代替「Be early」。
對於以「let」開頭的肯定祈使句，其否定形式為「Don't + let + 賓語 + 動詞原形 + 其他成分」，如「Don't let him go」代替「Let him go」。
對於以實義動詞原形開頭的肯定祈使句，其否定形式通常為「Don't + 動詞原形」，如「Don't run in the hallways」代替「Run in the hallways」。
此外，還可以使用「never」構成否定含義來加強語氣，如「Never judge a person by looks」。在公共場所，也常見使用「No + 動詞的ing形式」來表示禁止做某事，如「No smoking」表示禁止吸菸。