抑菌圈打孔法是一種用於測定抗菌物質活性的生物學實驗方法。這種方法涉及使用打孔器或鋼管在試驗平板上打出一定直徑的孔洞，然後將含有待測樣品的溶液注入這些孔洞中。經過一段時間的培養後，觀察並測量抑菌圈的大小，從而評估樣品的抗菌效果。
以下是抑菌圈打孔法的主要步驟：
準備器皿和用品：需要準備培養皿（直徑90 mm）、打孔器（孔徑6 mm）、牛津杯（內徑6 mm）、不鏽鋼圓管（外徑6 mm）、濾紙、三角瓶（250 mL）。
培養基製備：
液體培養基：蛋白腖10 g/L, 酵母粉5 g/L, NaCl 10 g/L, pH 7.8。
平板培養基：蛋白腖10 g/L, 酵母粉5 g/L, NaCl 10 g/L, 瓊脂粉20 g/L, pH 7.8。
菌種活化及菌液製備：
將冷凍保存的菌種劃線接種至平板培養基，37℃培養24小時。
挑取單菌落接種至100 mL液體培養基，37℃、200 r/min搖床培養過夜，製備菌液。
塗布平板法：
在已滅菌的平板中傾注約20 mL平板培養基，水平靜置凝固。
接種0.1 mL菌液，塗布均勻後備用。
傾注平板法：
在已滅菌的平板中接種1 mL菌液。
然後傾注約20 mL已冷卻至50℃左右的平板培養基，混合均勻，水平靜置凝固後備用。
預加菌液傾注平板法：
往已冷卻至50℃左右的平板培養基中注入一定量的菌液，混合均勻。
傾注平板（約20 mL/平板），水平靜置凝固後備用。
通過上述步驟，可以在含有待測樣品的孔洞周圍觀察到抑菌圈的形成。抑菌圈的大小是評估樣品抗菌效果的重要指標。這種方法不僅適用於評估抗菌藥物的活性，也適用於研究其他具有抗菌作用的化合物或物質。