植物DNA提取的常用方法包括CTAB法、SDS法、氯化節法、高鹽低pH法、果膠酶法等。具體如下:
CTAB法。CTAB即十六烷基三乙基澳化按,是一種陽離子去污劑,能與核酸形成複合物。這些複合物在低鹽溶液中會因溶解度降低而沉澱,而在高鹽溶液中可解離,使DNA和多糖分開。再用乙醇沉澱DNA除去CTAB。
SDS法。相比CTAB,SDS法更加方便簡單,近年來科研者們提出了利用SDS、Tris-Cl-EDTA直接裂解細胞使其釋放出DNA的方法。後續的DNA純化過程中通常採用酚/氯仿處理。
氯化節法。此法的提取獲得率較高,因為氯化節不僅與植物細胞壁上的多糖羥基反應生成醚,而且與細胞液中多糖物質反應破壞糖鏈,有利於DNA的釋放和提純。
高鹽低pH法。該方法是以無機鹽和異丙烯為提純試劑提取DNA的方法。通常採用的無機鹽為低pH的醋酸鉀,用來沉澱蛋白質。
果膠酶法。利用果膠酶對植物破碎細胞進行抽提的一種技術。
這些方法都有其特定的套用場景和優缺點,在實際操作中需要根據具體需求和實驗條件選擇合適的方法。