細胞螢光染色的步驟通常包括以下內容：
細胞培養。將細胞培養至適當的密度，通常在70%到80%匯合時進行染色。
漂洗。使用PBS輕輕漂洗細胞，去除培養基中的雜質。
固定。加入適量的固定液（如4%多聚甲醛）室溫下固定10至30分鐘，具體時間取決於實驗要求。
漂洗。用PBS輕輕漂洗細胞3次，以去除未固定的物質。
透化（可選）。使用0.2%至0.5%的Triton X-100對細胞進行透化處理，以提高抗原的可及性，這一步對於檢測細胞膜內側的蛋白是必要的。
封閉。使用2%BSA或10%正常血清封閉30分鐘，以減少非特異性染色。
一抗孵育。加入用封閉液稀釋的一抗，室溫下孵育1小時或4℃過夜。
漂洗。用PBS輕輕漂洗細胞3次，去除未結合的一抗。
二抗孵育。加入用封閉液稀釋的螢光標記的二抗，避光條件下室溫孵育30至45分鐘。
漂洗。再次用PBS輕輕漂洗細胞3次，去除未結合的二抗。
染核（可選）。使用Hoechst 33258等染料對細胞核進行染色。
觀察。在螢光顯微鏡下觀察並記錄染色結果。
這些步驟涵蓋了免疫螢光染色的基本流程，但具體細節可能因實驗要求和使用的抗體、染料的不同而有所變化。