缺口平移法（Nick Translation）是一種用於標記雙鏈DNA探針的技術，它依賴於DNA聚合酶I的多種酶促活性，將標記的三磷酸脫氧核糖核苷酸（dNTP）摻入新合成的DNA鏈中，從而產生高比活性的均勻標記DNA探針。
其基本原理是，先用DNA酶I在DNA探針的一條鏈上打開一個或多個缺口（nick），在缺口處形成3'端羥基。隨後，利用大腸桿菌DNA聚合酶I的5'→3'外切酶活性，將缺口5'端的核苷酸依次切除。同時，在大腸桿菌DNA聚合酶I的5'→3'聚合酶活性的催化下，以另一條DNA鏈為模板，以dNTP為原料，將dNTP順序連線到缺口的3'端羥基上。這樣，隨著缺口的移動，標記的核苷酸就摻入到新合成的DNA鏈中，替代了原DNA分子上的部分核苷酸。
這種方法適用於線狀、超螺旋以及帶缺口的環狀雙鏈DNA。其優點包括快速、簡便、標記的探針均勻、特異性高，適用於較長的雙鏈DNA。然而，這種方法也有一些缺點，例如需要較多的DNA模板（>200ng），且標記效率較低。