蠶的性別可以通過不同的特徵來區分。在幼蠶階段，可以通過觀察蠶的尾部來區分雌雄。雌蠶尾部第二、三節腹面有四個凹形的小圓點，稱爲石渡氏腺，而雄蠶在這兩節之間有一箇凸起的小圓點，稱爲海洛爾特氏腺。此外，雌蠶的腹部第八、九節腹面中央有一條直線，而雄蠶的腹部第九節腹面中央有一對小突起。在蠶蛾階段，雄蛾的外生殖有成對的抱握器，而雌蛾的交配孔附近有一片黑色的骨板。
成年蠶的性別也可以通過外貌特徵來區分。雄蠶通常身體比雌蠶稍小，體重輕，生長期短，喫的桑葉量也比雌蠶少。在蠶的腹部第八、九節處，雌蠶有四個透明小點，而雄蠶只有一箇透明小點位於第九節腹面中央。
吐絲量的多少也可以用來區分雌雄蠶。雄蠶比雌蠶產絲量多，因爲雄蠶生殖腺發育所需的物質量較少，相對地來講，雄蠶將較多的物質用於吐絲結繭。由於體內物質利用不同，雌蠶吐絲比雄蠶要少一些。