超薄切片技術是一種用於製備極薄樣品的技術,主要用於透射電子顯微鏡(TEM)觀察,這種切片通常小於100納米(nm)厚。超薄切片技術的關鍵步驟包括:
取材。從生物體上取下組織,或者從細胞和微生物的培養物中取得所需材料。
固定。使用固定劑如戊二醛或鋨酸來固定組織,以保持細胞結構在生活狀態下的狀態,固定後,組織內部會變得乾燥,減少細胞自溶和微生物繁殖的可能性。
脫水。使用不同濃度的酒精或丙酮對樣品進行梯度脫水,以清除組織中的游離水。
滲透。使用包埋劑(如環氧樹脂)滲透到組織內部,取代脫水劑。
包埋。用樹脂將樣品包埋起來,使其具有足夠的硬度以便被切成超薄切片。
切片。使用超薄切片機將樣品切成厚度約為90納米的切片。
染色。對切片進行電子染色處理,增加圖像的反差,便於觀察。
超薄切片技術在生物學和醫學研究中非常重要,尤其是在觀察生物體的微細結構和細胞內部結構方面。