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酚水法

酚水法是一種用於提取細菌脂多糖(LPS)的實驗室技術,由Westphal等於1952年提出,並是目前套用最廣泛的方法之一。該方法主要適用於S型細菌LPS的提取,也可用於R突變型細菌LPS的提取,儘管其產量相對較低。在酚水法中,提取液含有苯酚和水的比例為45:55。當提取液加熱至68℃並維持5分鐘後,苯酚和水形成單一相,冷卻至4℃後,形成兩個相,分別為苯酚相(被水飽和)和水相(被苯酚飽和)。核酸、多糖及大部分LPS溶解於水相中,而蛋白質及其他不溶性物質則沉澱在兩相交界處。含有LPS的水相經過吸取、透析(去除苯酚)並乾燥後,得到LPS的粗製品。進一步通過超離心處理,可以精製得到LPS。儘管精製後的LPS仍含有多糖成分、類脂體A成分以及少量肽(1~3%),但這種提取物能展示O特異性側鏈抗原反應,對人、兔的抗原性較弱,但能結合補體,分子量有幾百萬。酚水法的產量大約為1~4%(占乾菌重)。