DNA Loading Buffer的配方如下:
6×Loading Buffer:
30mM EDTA
36%(v/v) Glycerol
0.05%(w/v) Xylene Cyanol FF
0.05%(w/v) Bromophenol Blue
10×Loading Buffer:
30mM EDTA
50%(v/v) Glycerol
0.25%(w/v) Xylene Cyanol FF
0.25%(w/v) Bromophenol Blue
這些成分主要用於DNA電泳。6×Loading Buffer含有兩種染料(溴酚藍和二甲苯腈藍FF),而10×Loading Buffer中僅含有溴酚藍一種染料。
製備方法(以6×Loading Buffer為例):
使用注射器吸取4ml甘油,加入15ml的離心管中。
加入4ml去離子水,顛倒混勻,使甘油與水充分互溶。
向離心管中加入200μL 0.5M的EDTA。
加入500μL 10%的SDS,注意輕輕加入,避免產生大量氣泡。
繼續加入1.3ml去離子水,此時離心管中總體積為10ml,輕輕顛倒混勻,避免產生氣泡。
稱取0.025g溴酚藍,加入離心管中,輕輕混勻。
將配製好的溶液分裝至1ml的離心管中,並存放於-20°C。日常使用時,將Loading Buffer放置在室溫即可。