Hoechst 33342是一種細胞核螢光染料,其檢測原理主要基於以下幾個方面:
細胞膜的通透性改變。在凋亡細胞中,細胞膜的通透性增強,使得Hoechst 33342能夠更多地進入細胞內部,因此凋亡細胞的螢光強度高於正常細胞。
染色體DNA結構的變化。在凋亡細胞中,染色體DNA的結構發生改變,使得Hoechst 33342能夠更有效地與DNA結合,從而增強了螢光信號。
細胞膜上的p-糖蛋白泵功能受損。凋亡細胞膜上的p-糖蛋白泵功能受損,不能有效地將Hoechst 33342排出到細胞外,導致細胞內積累增加,進一步增強了螢光信號。
活細胞與固定細胞的區分。Hoechst 33342不能穿透細胞膜完整的正常細胞或凋亡細胞,因此活細胞對Hoechst 33342拒染。而壞死細胞由於細胞膜的完整性在早期即已喪失,可以被Hoechst 33342染色。
綜上所述,Hoechst 33342通過其特定的螢光特性,可以用於區分活細胞中的正常細胞、凋亡細胞和壞死細胞。