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nanodrop原理

紫外吸收

Nanodrop是一種超微量分光光度計,其檢測原理主要基於紫外吸收。Nanodrop 2000這款儀器的檢出限是2ng/μl-15000ng/μl(dsDNA),當核酸濃度在2~100ng時,檢出限為SD±2 ng/ul;如果樣本濃度高於100ng/μl,CV值為±2%。此外,Nanodrop還可以用於內毒素檢測,其原理是利用鱟變形細胞裂解物(Limulus amebocyte lysate,LAL)檢測,當鱟變形細胞遇到革蘭氏陰性菌中的脂多糖(LPS)時,凝血級聯反應被激活,活化的凝血酶催化合成底物Ac-Ile-Glu-Ala-Arg-pNA釋放對硝基苯胺(pNA),釋放的pNA會產生一種黃色可見光,最後使用NanoDrop超微量分光光度計測定405 nm處的吸光度並進行定量分析。NanoDrop One/OneC超微量分光光度計通過光纖技術和液體表面張力特性來達到測定樣品的目的,可輕鬆實現快速微量檢測。當儀器檢測臂降下時,樣品將形成一個液柱,彌合兩根光纖之間的空隙,從而實現樣品檢測。