oligo合成

Oligo合成是一種化學過程，用於生成短的DNA或RNA序列。這一過程通常涉及以下步驟：

固相合成：Oligo合成開始於將核苷酸結合到固相載體（如CPG）上。在催化劑的作用下，核苷酸之間通過磷酸二酯鍵連線，形成DNA鏈。這一過程包括去保護、偶聯、加帽（可選）及氧化四個主要步驟。

化學合成法：自20世紀50年代以來，Oligo的化學合成經歷了顯著發展。最初採用磷酸二酯法，隨後發展出基於亞磷醯胺的DNA合成方法，這是目前自動化生產Oligo的主要技術。這種方法涉及去保護、偶聯、加帽（可選）及氧化四個基本反應步驟。

純化過程：由於合成過程中會產生雜質，如脫下的保護基、短鏈和鹽，Oligo的純化是一個重要步驟。純化方法包括脫鹽（如酒精沉澱、分子篩或RPC柱）、OPC柱純化和HPLC等。這些步驟有助於去除雜質，提高Oligo的純度和質量。

合成長度限制：由於化學反應效率、合成純度及產率的下降，目前化學方法合成的Oligo長度一般不會超過200個核苷酸。為了提高通量和精確度，已經發展出基於微陣列晶片的DNA合成策略。

套用：Oligo合成在分子生物學、醫學研究、診斷和治療中有著廣泛的套用，如作為PCR反應的引物、基因表達的調控元件等。

綜上所述，Oligo合成是一個複雜的過程，涉及多個化學反應步驟和後續的純化過程，以確保最終產物的質量和純度。