qPCR（定量聚合酶鏈反應）是一種強大的分子生物學技術，廣泛套用於生物學研究、疾病診斷、遺傳疾病篩查等領域。qPCR分析通常涉及以下關鍵步驟和技術：
螢光化學的選擇。qPCR分析中使用的螢光化學主要有兩種類型：螢光探針和螢光染料。SYBR Green I是一種常用的螢光染料，它在PCR過程中嵌入雙鏈DNA後發射螢光信號，而TaqMan探針則是一種寡核苷酸探針，帶有螢光基團和淬滅基團，能夠在PCR擴增時特異性識別目標序列。
樣品準備和數據分析。在進行qPCR之前，需要準備高質量的DNA或RNA樣品。數據分析時，可以使用絕對定量或相對定量的方法。絕對定量通常涉及標準曲線法，通過已知濃度的標準品來確定未知樣品的濃度。相對定量則用於分析特定基因相對於參考基因的表達水平。
Ct值的概念和分析。Ct值（Cycle threshold）是qPCR中的一個關鍵參數，代表螢光信號達到設定閾值時的循環數。Ct值與模板的起始拷貝數之間存線上性關係，因此可以通過Ct值來推斷模板的初始濃度。
qPCR技術因其高靈敏度、特異性和動態範圍而被廣泛套用於生物學和醫學研究。隨著技術的發展，qPCR分析在實驗設計、數據分析方面也在不斷進步，為科學研究提供了強大的工具。