RQ值(Relative Quantification),也稱爲相對定量值,在處理熒光定量PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶鏈反應)結果時,用於表示某基因的相對錶達量,有時也被稱爲fold change,即倍數變化。RQ值的計算方法如下:
△Ct分析:
△Ct = 實驗樣本處理組Ct值 - 對照樣本Ct值
PCR的產物量以指數函數增長,表達差異即RQ值爲2△Ct。這種方法誤差較大,只能描述趨勢。
△△Ct分析(Ct差值比較法):
引入內參基因(通常是管家基因),這些基因在所有細胞中均表達,受環境影響小。
實驗樣本ΔCt = 實驗樣本處理組Ct值 - 實驗樣本處理內參Ct
對照樣本ΔCt = 對照樣本Ct值 - 對照樣本內參Ct
△△Ct = 實驗樣本ΔCt - 對照樣本ΔCt
RQ值 = 2△△Ct。這種方法提供了更準確的相對定量結果。
通過上述方法,可以計算出實驗樣本與對照樣本之間某基因表達量的相對變化,即RQ值。