X失活，也稱為X染色體失活（XCI），是指在雌性哺乳動物中，兩條X染色體中的一條在遺傳性狀的表達上喪失功能的現象。
X失活是雌性成體細胞中的一種表觀遺傳學現象，主要發生在胚胎發育早期。在這一過程中，兩條X染色體中的一條會隨機選擇失活，這個選擇通常是隨機的，可以是來自父親或母親的X染色體。失活的X染色體在基因轉錄上沉默，而另一條則保持活性，這種失活是永久且克隆式的，意味著一旦特定細胞內的X染色體失活，其所有子代細胞將繼承這一失活的X染色體。
X失活的機制涉及多種因素，包括X染色體上特定的基因、RNA的穩定性和傳播、以及與X染色體相關的蛋白質編碼。例如，X染色體失活中心基因（Xist）的轉錄產物在失活過程中起著關鍵作用。此外，失活的X染色體上的某些基因可能發生逃逸，即它們不遵循失活的規律，這種情況下的逃逸基因通常分布在X染色體的短臂上。
Lyon假說是關於X染色體失活的一個重要理論，它解釋了X染色體失活的隨機性、近完全性以及永久性等特點。