培養酵母菌的方法主要包括以下幾個步驟:
準備培養基。選擇合適的培養基,如液態的YPD培養基或固態的YPDA培養基(YPDA培養基中加入瓊脂)。液態培養基通常需要滅菌後使用,而固態培養基則需先製備,然後將其倒入無菌的培養皿中並等待凝固。
分離酵母菌。使用表面分離法或液體稀釋法從含有酵母的樣品中分離出單個菌落。表面分離法是將酵母樣品滴加到含有瓊脂的培養皿上,而液體稀釋法是通過連續梯度稀釋酵母樣品。
接種酵母菌。將分離得到的酵母菌落接種到培養基上。對於液體培養,將酵母菌接種到一定體積的培養基中,然後放入搖牀中培養;對於固體培養,將培養基裝入無菌的培養皿中,等待凝固。
培養環境。在培養過程中,需要注意溫度、攪拌速度和氧氣供應等因素。通常,液體培養在30℃下,200轉/分鐘的條件下培養過夜;而固體培養則需要在恆溫培養箱中培養24小時。
觀察和篩選。培養後,觀察培養基上是否長出菌落,並記錄菌落的生長情況。通過劃線接種的方式,可以進一步稀釋和分離酵母菌,以獲得單菌落。
此外,爲了確保無菌環境,在操作前應使用酒精噴壺對桌面進行滅菌,並在接種過程中避免直接接觸培養基。