封片技巧主要包括以下幾個方面：
去除石蠟殘留。在染色前，使用二甲苯去除石蠟切片上的石蠟，建議延長處理時間以提高效率。
血清封閉。通常採用動物血清進行封閉，建議在室溫下封閉1至2小時，如果室溫較低，可以考慮在37℃孵育箱中進行，以最佳化封閉效果。
抗體濃度控制。通過預實驗確定一抗的最佳濃度，建議採用「棋盤法」進行濃度梯度預試，避免濃度過高導致自發螢光。
螢光二抗選擇。選用高質量的螢光二抗，以減少未標記游離螢光素的殘留，這些游離螢光素可能導致自發螢光。
陰性對照。每次實驗準備只染二抗的陰性對照，以確保實驗結果的可靠性。
封片劑選擇。選擇合適的封片劑進行封片，避免螢光淬滅。
封片操作。確保切片上沒有多餘的液體，緩慢放置蓋玻片，避免產生氣泡。使用適量的封片劑，避免過多或過少。
封片劑配方。適當稀釋樹膠，以避免氣泡和過厚的膠層。可以在通風櫥中加熱樹膠以改善流動性。
封片細節。擦去切片上多餘的二甲苯，適量滴膠，傾斜蓋子一端，緩慢蓋下，觀察膠液流動覆蓋組織。
通過遵循這些步驟和注意事項，可以提高封片質量，保護樣本並確保實驗結果的準確性。