核酸提取的方法主要有以下幾種:
溶液法。這是最經典的核酸提取方法,其過程包括細胞破碎或組織勻漿後使用苯酚和仿處理。在水相中主要是DNA,有機相中主要是多糖和脂類物質,而蛋白質則沉澱於兩相之間。通過離心分層後取出水層,經過多次重複操作,並合併含核酸的水相,利用核酸不溶於醇的性質,用乙醇或異丙醇來沉澱核酸,然後再進行分離和純化、溶解後即可得到高純度核酸。
柱膜法。該方法基於矽膠膜吸附原理。矽膠膜表面的矽醇基團呈弱酸性,水化後帶負電。在特定條件下,DNA會牢固地吸附在矽膠膜表面。在低鹽水溶液中,DNA磷酸基團和矽膠膜的矽醇基團之間存在靜電排斥,從而使矽膠膜釋放DNA。
磁珠法。這種方法運用納米技術,使用超順磁性氧化矽納米磁珠與核酸分子特異性地識別並高效結合。在異硫氰酸胍、鹽酸胍和外加磁場的作用下,能從樣本中將核酸分離出來,並洗去非特異性吸附的雜質,得到純化後的核酸。
這些方法在具體套用時可能需要根據核酸的類型(如DNA或RNA)、樣品的性質以及所需的純度水平進行調整。