水蛭素的提取過程主要包括以下步驟:
準備水蛭。首先將水蛭洗淨去除泥土等雜質,然後整體搗碎成泥漿狀。
調整pH值和加溫。將水蛭漿加溫至60~80°C,維持2~3分鐘,然後加入冰醋酸或Na2CO3調整pH值至4.4~4.6。
離心和收集上清液。冷卻水蛭漿至25~30°C,再次調整pH值至6~7,接著進行離心處理,收集母液。
浸提和沉澱。殘渣用生理鹽水反覆洗滌,母液透析後用95%以上的乙醇進行分級沉澱。
乾燥和溶解。將沉澱進行真空乾燥得到粗製品,然後用適量的二次蒸餾水溶解,再次進行透析。
滅菌和冷凍乾燥。透析液經過抽濾滅菌,然後進行冷凍乾燥,得到精品。
此外,還有一種仿生誘導法,這種方法通過模擬自然條件誘導活體水蛭分泌唾液(含有天然水蛭素),避免了傳統方法對水蛭的直接使用,減少了對水蛭資源的消耗。