活化能可以通過阿倫尼烏斯公式進行計算，該公式為k=Ae^(-Ea/RT)，其中k是化學反應速率常數，R是摩爾氣體常數，T是熱力學溫度，Ea是活化能，A是指前因子。這個公式反映了化學反應速率常數k隨溫度T變化的關係。
另外，活化能也可以通過平衡常數K和阿倫尼烏斯公式進行計算，公式為lnk=lnA—Ea/RT。平衡常數K與吉布斯自由能△G有關，而△G可以通過△H和△S計算得到。
此外，活化能也可以通過實驗測定的不同溫度下的速率常數k值，將lnk對1/T作圖，求出直線斜率，該斜率的絕對值即為活化能Ea。