湖南省和湖北省的分界線主要是洞庭湖，具體來說：
洞庭湖以南屬於湖南省，簡稱「湘」，省會城市為長沙。
洞庭湖以北屬於湖北省，簡稱「鄂」，省會城市為武漢。
此外，兩省的實際邊界線很長，不僅包括洞庭湖，還有以下特點：
在東部，有一段邊界是以長江為界。
在中西部，邊界主要是陸地邊界。
需要注意的是，雖然洞庭湖是兩省分界的重要標誌，但隨著轄區的變化，現在的湖南和湖北分界線已經不再局限於南部和北部，而是變得更加複雜和多樣。例如，湖北的赤壁市就位於湖南臨湘市的東部，而湖北恩施土家族苗族自治州則位於湖南張家界的西北地區。