無菌手套的穿戴步驟如下：
準備手套和無菌環境。確保手套和無菌生理鹽水等物品準備妥當。
打開手套包裝。從封口處撕開手套的外包裝，取出內包裝的手套。
穿戴手套。分次取戴無菌手套，右手捏住左手手套的反折面，左手插入手套內，右手同時上提戴上左手手套。用已戴好手套的左手手指插入右手手套的反折邊內，將手套取出。右手插入手套內，左手同時上提並將右手手套的反折部向上翻。戴上右手手套。
檢查手套的完整性。戴好手套後，雙手擠壓檢查有無破裂。
脫手套。一手捏住另一隻手的手套口翻轉脫下。以脫下手套的另一隻手伸入另一隻手套內，將其脫下。將手套的裡面翻套在兩隻手套外面。
處理用過的手套。將用過的手套放入醫用垃圾袋中備處理。
穿戴無菌手套時需注意：
在穿戴過程中，要避免接觸手套的外面。
穿戴好後的手套不可接觸未戴手套的手。
確保手套的反折邊翻轉並蓋住手術衣的袖口。
在必要時，可用無菌鹽水沖洗手套外面的滑石粉。