米老鼠的女性角色中，最著名的伴侶是米妮（Minnie），她是米奇（Mickey）的女朋友。米妮在米老鼠系列動畫中首次出現在《瘋狂的飛機》中，她以其甜美的外貌和勇敢的性格深受觀眾喜愛。米妮的標誌性特徵包括她頭上常戴的大蝴蝶結，這使她在眾多角色中顯得格外突出。儘管米妮在平時可能顯得有些害羞，但在面對危險時，她會展現出勇敢的一面，尤其是當面對威脅米奇的敵人時。
此外，還有一位重要的女性角色是克拉貝爾（Clarabelle Cow），她是一頭擬人化的牛，在迪斯尼動畫中是米奇和高飛的好友，也是賀瑞斯馬的戀人。克拉貝爾的角色雖然不如米妮那樣廣為人知，但她在米老鼠系列中同樣扮演著重要的角色。
綜上所述，米老鼠系列中最重要的女性角色包括米妮和克拉貝爾，兩者都在各自的領域內為觀眾所熟知和喜愛。