紅茶菌的製作步驟如下：
準備一個能裝2至5斤水的玻璃瓶和一雙筷子，用開水消毒後備用。
用乾淨紗布包裹一點茶葉和一點白糖（紅糖雜質多慎用），放入水壺中，然後加入水，燒開直到白糖完全溶解。
將燒開的茶糖水離火降溫，待茶糖水降至40度以下時，取出包茶葉、白糖的紗布袋，將茶糖水倒入玻璃瓶中，不要倒滿，留些空隙以便空氣流通。
將紅茶菌菌種（包括菌母和菌液）倒入玻璃瓶中，然後用乾淨紗布蓋住瓶口並用繩子紮好，放在光線好的地方以便觀察，儘量不要搖動，溫度保持在25至30度，大約4天即可培養成功；如果溫度在15至25度之間，則6天左右可成功培養。
當紅茶菌培養成功，可以將其移至多個玻璃瓶中，加入新的茶糖水繼續發酵。
需要注意的是，整個過程中使用的容器和工具都不能有油污，必須徹底清洗並消毒。此外，紅茶菌的培養需要弱酸性環境，因此茶糖水的pH值應保持在3到7之間。