使用紫外線燈時，首先確保使用環境清潔，空氣中沒有灰塵和水霧。在消毒前，檢查電壓和頻率是否與產品相符，並使用匹配的電源插座。接通電源後，等待燈管發出紫外光，此時紫外線消毒工作已經開始。使用時，應關閉門窗，自燈亮5-7分鐘後計時，每次消毒時間不得少於60分鐘。在照射過程中，應避免人員進入室內，若必須進入，應先關閉紫外線燈，等待15至20分鐘後通風換氣再進入。
消毒物品時，將物品攤開或掛起，擴大照射面，有效距離爲一米，照射30分鐘左右。在室內溫度低於20攝氏度或相對溼度超過50%時，應延長照射時間。擦洗地面後，需等待地面乾燥再進行紫外線燈消毒。
使用後，先通風，15至20分鐘後再進入房間。紫外線對人體皮膚黏膜有一定損害，使用時應做好防護，避免眼睛直視紫外線光源。紫外線燈管表面應保持清潔，無灰塵，建議每週用95%乙醇棉球擦拭一次，並做好使用記錄。