菌落PCR是一種分子生物學技術，其原理和步驟如下：
原理：
傳統的PCR技術需要先提取DNA模板，這通常涉及細菌培養、質粒製備等多個步驟，過程繁瑣且耗時。菌落PCR技術直接以單個菌落作為模板，省去了提取DNA模板的步驟，從而大大簡化了操作並節約了時間。
在菌落PCR中，使用無菌牙籤挑取單個菌落到TE緩衝液中，經過煮沸使細菌裂解，釋放出DNA。然後，通過特異性引物或通用引物對目的基因進行PCR擴增，以此來鑑定菌落是否含有目的質粒或基因。
步驟：
準備固體培養基上培養的單菌落。
使用無菌牙籤挑取單個菌落到TE緩衝液中。
將菌液煮沸10分鐘，使細菌裂解。
渦旋振盪後短暫離心，取上清液作為DNA模板。
進行PCR擴增，使用特異性引物或通用引物。
根據PCR產物的大小和特異性，判斷菌落是否為陽性克隆。
套用：
菌落PCR常用於快速鑑定含有目的基因或質粒的陽性菌落，尤其在轉化實驗和分子克隆中非常有用。
它可以通過PCR手段迅速篩選陽性克隆子，使用的引物通常定位在插入位點外側的載體區，這樣即使插入的序列各不相同，也不會影響擴增反應的進行。
通過上述原理和步驟，菌落PCR成為了一種快速、高效的分子生物學技術，廣泛套用於科研和工業領域。