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蒽酮硫酸法原理主要基於糖類在濃硫酸作用下脫水生成的糠醛或羥甲基糠醛與蒽酮反應生成藍綠色糠醛衍生物的特性。
在一定範圍內,顏色的深淺與糖的含量成正比,因此可以通過比色測定有色產物的吸光度來定量糖的含量。