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酶法提取法

酶法提取法是一種用於分離和純化酶的技術,它涉及不同的提取方法和溶劑。以下是酶法提取法的主要方法:

鹽溶液提取法:大多數蛋白酶在水中溶解,並在低濃度的鹽溶液中發生鹽溶現象,鹽溶是指蛋白質分子在鹽溶液中溶解度增加的現象。鹽溶液的濃度一般控制在0.02-0.5mol/l。

酸溶液提取法:某些酶在酸性條件下溶解度較大且穩定性好,因此適合使用酸溶液進行提取。pH值一般控制在2—6,需要根據酶的性質選擇合適的pH值,以避免過低的pH值導致酶失活。

鹼溶液提取法:對於在鹼性條件下溶解度較大且穩定性較好的酶,應採用鹼溶液進行提取。pH值一般控制在8—12,同樣需要根據酶的性質選擇合適的pH值,以避免過高的pH值引起酶失活。

有機溶劑提取法:與脂質結合牢固或含有較多非極性基團的酶,可以使用能與水混溶的有機溶劑如乙醇、丙酮、丁醇等進行提取。

此外,胞內酶或與細胞結構結合的酶需要經過細胞破碎過程,這可以通過機械法(如絞碎、研磨、超音波等)、化學法(如使用鹽、鹼、表面活性劑等)、酶解法(使用溶菌酶等降解細胞膜結構)或凍融法實現。

提取過程中,溶劑用量一般為原料重量的1~5倍,攪拌可加速提取,但轉速不宜太快,以免產生泡沫或使酶變性。提取液體積可以通過多段逆流提取或柱型抽提法減少。液渣分離可以通過過濾法(如板框壓濾、旋轉真空過濾)或離心法實現。