CFSE(Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester,羧基螢光素琥珀醯亞胺酯)是一種廣泛用於細胞增殖檢測的螢光染料。其原理如下:
穿透細胞膜:CFSE能夠自由穿透細胞膜。
與胞內蛋白結合:進入細胞後,CFSE與細胞內的蛋白質上的游離胺基反應,形成具有螢光的蛋白複合物。
不可逆結合:這種結合是可逆的,但一旦結合,CFSE就不能從細胞中釋放出來。
被酯酶水解:在細胞內,CFSE的乙酸基團可以被內源的酯酶水解,釋放出綠色螢光。
螢光強度變化:在細胞分裂增殖過程中,具有螢光的胞內蛋白被平均分配到兩個子代細胞中,導致螢光強度逐級遞減。
檢測套用:通過流式細胞儀檢測分析細胞螢光強度的變化,可以判斷細胞的增殖情況。
CFSE因其高靈敏度、高特異性和可重複性等特點,被廣泛套用於免疫學、腫瘤學、神經科學等領域。此外,標記的CFSE細胞在體內觀察螢光可以保存長達數周之久,常用於活體細胞追蹤檢測實驗和用螢光電鏡觀察細胞長期活動的實驗。