凝膠排阻色譜
GFC原理通常指的是凝膠排阻色譜(Gel Filtration Chromatography)的原理。這是一種基於物質分子大小差異的液相層析分離純化方法。在分子篩色譜中,使用的基質通常是具有立體網狀結構的珠狀顆粒,這些顆粒類似於篩子。當混合物樣品被加入到層析柱中進行洗脫時,不同大小的分子會有不同的洗脫行為:
大分子物質由於無法進入凝膠基質內部,只能沿著顆粒間的空隙隨溶劑流動,因此會較快地流出柱外。
小分子物質則可以進入凝膠顆粒內部,並在不同的顆粒間多次進入和逸出,導致它們的移動速度較慢,從而在較晚的時間點流出柱外。
中等大小的分子則可以在凝膠顆粒內外分布,並且部分進入顆粒,因此它們會在大分子和小分子之間被洗脫。
這種分離方法基於分子的大小,而不是電荷或其他物理化學性質,因此可以用於分離各種類型的分子,包括蛋白質、多肽、酶、病毒等。