HRP（辣根過氧化物酶）標記的原理主要包括以下步驟：
封閉氨基：首先，為了防止酶蛋白的氨基與醛基反應發生自身偶聯，使用2,4-二硝基氟苯（DNFB）封閉酶蛋白中殘存的α-和ε-氨基。
氧化糖基：接著，HRP的糖基通過用過碘酸鈉氧化成醛基。這一步是為了讓HRP的糖基能夠與抗體IgG的氨基結合。
形成共價鍵：氧化後，加入抗體IgG，醛基與IgG的氨基結合，形成穩定的Schiff氏鹼。這種共價鍵的形成是標記過程中的關鍵步驟。
穩定共價鍵：為了防止HRP中糖的醛基與其自身蛋白氨基發生偶合，以及穩定Schiff氏鹼，最後使用硼氫化鈉來穩定這種結構。
通過以上步驟，HRP可以有效地與抗體IgG結合，形成標記有HRP的抗體，這種標記抗體在後續的實驗中可以用於檢測和定位目標抗原。