iTRAQ(同位數標記相對和絕對定量技術)是一種質譜定量技術,主要用於定量蛋白質。其工作原理如下:
相對定量。分為標記定量和非標記定量,其中iTRAQ屬於標記定量的一種。
絕對定量。通過在肽段上連線不同的標籤來實現。
iTRAQ技術使用特定的試劑,這些試劑包含報告基團、平衡基團和反應基團。在實驗中,不同樣品的同一位肽段被這些試劑標記後,它們具有相同的質量數。在一級質譜檢測(MS1)中,這些標記的肽段表現為相同的質譜峰。當這些質譜峰被選定進行二級質譜檢測(MS2)時,不同的報告基團被釋放,各自質譜峰的信號強度代表不同樣品中該肽段及其對應的蛋白質表達量的高低。這種方法允許用戶比較和定量多個樣品中的蛋白質表達水平。