MTT比色法,全稱噻唑藍比色法,是一種廣泛套用於生物學和醫學研究中的技術,用於檢測細胞存活和生長。其檢測原理主要基於活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶,該酶能夠將外源性的MTT(噻唑藍)還原為不溶於水的藍紫色結晶甲臢(Formazan),這種結晶會沉積在細胞中。而死細胞則沒有這種功能。隨後,使用二甲基亞碸(DMSO)溶解細胞中的甲臢,通過酶聯免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值,可以間接反映活細胞的數量。在一定細胞數範圍內,MTT結晶形成的量與活細胞數成正比。
MTT比色法的套用範圍廣泛,包括大規模抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗、腫瘤放射敏感性測定以及生物活性因子的活性檢測等。其特點是靈敏度高、經濟實用。
此外,MTT比色法與CCK8法等其他細胞活性檢測方法相比,雖然操作步驟和檢測時間方面有所最佳化,但仍然需要較長的操作步驟,並且生成的Formazan需要經DMSO溶解後才能檢測,這增加了工作量,同時也可能影響測定結果的準確性。因此,研究人員一直在尋求更快速、更準確的方法來替代或改進MTT比色法。