NO的作用可以從兩個方面來理解：
語言學角度：
副詞：NO作為副詞時，表示「不，完全不」，用於否定回答或陳述，也可以用於表示驚奇或不幸時的慘呼。
形容詞：NO作為形容詞時，表示「沒有的，全無的；極少的；禁止的」，與可數名詞的單數或不可數名詞連用，謂語動詞用單數；與可數名詞的複數連用時，謂語動詞用複數；也可表示某事被禁止，即「不許的；不可的」；還可表示與所說的事截然不同。
生物學角度：
NO是一種氣體信號分子，適量的NO釋放能引起生物體的一系列生理作用。NO在中樞和外周神經系統中作為遞質，因其擴散快、傳導距離長而在學習和記憶中發揮作用。同時，作為一種舒血管劑，NO在腦內大血管活動中起重要作用。
如果NO的釋放過量或不足，則會產生一系列病理作用，危害人體健康。
綜上所述，NO在語言學中作為一個詞彙，具有否定的意義，而在生物學中作為一種氣體信號分子，對生物體的生理功能有著重要的調節作用。