PBST配置的具體步驟如下：
準備PBS緩衝液。稱取7.9克氯化鈉(NaCl)、0.2克氯化鉀(KCl)、0.24克磷酸二氫鉀(KH2PO4)和1.8克磷酸氫二鉀(K2HPO4)或2.9克十二水合磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O)，將這些物質溶解在800毫升蒸餾水中。
調節pH值。使用鹽酸(HCl)調節溶液的pH值至7.4。
定容。將溶液加蒸餾水定容至1升。
加入吐溫-20。向100毫升的PBS緩衝液中加入300微升吐溫-20(Tween-20)。
混勻。混勻後即可使用。
需要注意的是，通常所說的濃度0.01M指的是緩衝溶液中所有的磷酸根濃度，而非Na離子或K離子的濃度，Na離子和K離子只是用來調節滲透壓的。