PCR Buffer在PCR(聚合酶鏈反應)中的作用主要是為Taq DNA聚合酶提供一個最適的酶催反應條件。PCR Buffer通常包含以下成分:
Tris-HCl。通常在10至50mmol/L的濃度範圍內,用於維持特定的pH值(例如pH8.3至8.8),這對於酶的活性至關重要。
鉀離子(KCl)。在50mmol/L以內時,可以促進引物的退火,有利於PCR反應。
鎂離子。對於酶催化過程至關重要,它結合到酶-底物複合體上,降低催化反應的活化能,從而促進反應進行。
其他添加劑。如小牛血清白蛋白、明膠或Tween 20等,有助於酶的穩定性和反應的進行,特別是對於擴增長片段的PCR反應。
此外,PCR Buffer還可能包含其他成分,如銨離子、甘油等,用於最佳化反應條件。總的來說,PCR Buffer的作用是為PCR反應創造一個最適合的反應環境,使酶的活性能達到最佳狀態。