qPCR原理是在PCR反應體系中加入螢光基團,利用螢光信號積累實時監測整個PCR進程,最後通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。在PCR擴增過程中,通過螢光信號的變化來實時監測每一個循環擴增產物量的變化,從而進行精確的定量分析。其中,螢光信號的增強與PCR產物的增加成正比,因此可以通過螢光信號的積累來推算出擴增產物的量。此外,qPCR還可以利用Ct值和標準曲線對起始模板進行定量分析,Ct值是指達到設定螢光閾值所需的循環數,與起始模板的拷貝數成反比。因此,根據Ct值和標準曲線可以準確地計算出起始模板的量,實現對目標基因或序列的準確、快速和靈敏地定量檢測。在實際套用中,qPCR技術已被廣泛用於基因檢測、表達分析、病原體檢測等領域。