RNA提取是一個關鍵步驟,用於從細胞或組織樣本中分離RNA。有多種方法可以用於提取RNA,每種方法都有其特定的套用場景和優缺點。常見的RNA提取方法包括:
異硫氰酸胍法(Trizol法)。使用異硫氰酸胍和苯酚的混合物裂解細胞,然後在特定pH條件下分離RNA和DNA。此方法能有效提取高質量的RNA。
苯酚-氯仿抽提法。利用苯酚和氯仿的混合物作為溶劑,通過離心分離水相和有機相,從而分離RNA。
矽膠膜法。通過矽膠膜純化柱去除雜質,離心洗脫獲得RNA。此方法操作簡單,適合新手使用。
離子交換法。利用離子交換材料純化RNA,可以得到高純度的RNA。
鹽析法。通過高鹽濃度沉澱RNA。
熱硼酸法和改良熱硼酸法。利用熱硼酸溶液裂解細胞,然後通過離心和其他純化步驟提取RNA。
氯化鋰-尿素法。使用高濃度尿素變性蛋白質,然後用氯化鋰沉澱RNA。此方法快速簡便,適用於大量樣品。
熱酚法。主要用於少量細胞樣品的RNA提取,操作簡單但產量不高。
選擇哪種方法取決於實驗的具體需求、樣本類型以及可用的實驗設備。例如,Trizol法和矽膠膜法適用於大多數常見的RNA提取需求,操作相對簡單;而離子交換法則適用於對RNA純度有極高要求的實驗。