Simoa技術，即單分子陣列技術，是一種先進的蛋白質檢測方法，其核心原理和步驟如下：
磁珠表面修飾：首先，將捕獲抗體通過化學反應偶聯到直徑為2.7μm的磁珠表面。每個磁珠表面擁有約250,000個結合位點，用於捕獲抗原。
抗原-抗體反應：磁珠與樣本中的目標抗原結合後，加入生物素標記的檢測抗體，形成雙抗夾心的免疫複合物。這一步驟確保了目標抗原的特異性識別。
酶標記：生物素標記的檢測抗體進一步與親和素標記的酶（如β半乳糖甘酶）結合，使得磁珠帶有酶標記。如果樣本中含有目標抗原，磁珠將帶有酶標記；不含目標抗原的磁珠則保持無標記狀態。
微孔陣列分析：反應體系極小，僅為50fL，與傳統ELISA相比，Simoa實現了1000倍的超高靈敏度。在微孔陣列晶片上，每個微孔體積約40fl，磁珠被分配至微孔中，形成單獨的反應環境。通過高解析度螢光顯微鏡對螢光點進行計數，依據泊松分布理論計算蛋白質濃度，實現單分子水平的檢測。
信號檢測與定量：通過加入底物並激發螢光，Simoa能夠檢測到單個分子的信號。利用統計方法分析螢光信號，實現對目標蛋白的精確定量。
Simoa技術的獨特之處在於其超高的靈敏度和單分子檢測能力，這使得它在生物標誌物發現、疾病早期診斷等領域具有廣泛套用。