Star活性，也稱星活性，是限制性內切酶在特定非標準酶切條件下表現出的一種非特異性酶切現象。在極端非標準條件下，例如高酶濃度、低離子強度、pH值改變、有機溶劑影響或使用其他二價離子替代鎂離子時，限制性內切酶的切割位點專一性會發生改變，不僅能夠切割特異性的識別位點，也能切割非特異性的位點，導致酶切條帶增多。
Star活性的出現可能與甘油濃度、pH值、離子濃度等因素有關。例如，當底物DNA難以切割時，可能需要增加酶量或延長反應時間。若使用的是易產生Star活性的限制酶，通常優先考慮增加酶量而非延長反應時間，因為延長時間相比增加酶量更易產生Star活性。實際上，幾乎所有的限制性內切酶都可能產生Star活性，但在常規實驗室操作中，其對實驗的影響通常不大。
為了抑制Star活性，建議儘量使用較少的酶進行完全消化反應，避免有機溶劑污染，提高離子濃度至100至150mM，調整反應緩衝液的pH值至7.0，並使用鎂離子作為二價離子。