TCA丙酮沉澱法是一種常用的蛋白質沉澱方法，其原理主要包括以下幾點：
形成不溶性鹽：在酸性條件下，三氯乙酸（TCA）能使蛋白質形成不溶性鹽，從而促使蛋白質沉澱。
蛋白質變性：TCA作為蛋白質變性劑，能引起蛋白質構象的改變，暴露出更多的疏水性基團，導致蛋白質聚集沉澱。
分子內部滲透：隨著蛋白質分子量的增大，其結構複雜性和緻密性也越大，TCA可能滲入分子內部，使得蛋白質較難被完全除去。在電泳前樣品加熱處理時，TCA可能導致蛋白質結構發生酸水解，形成碎片。
具體的操作步驟如下：
將粉末分裝於離心管中，加入預冷的10% TCA丙酮和PMSF，渦旋混勻後置於冰上。
使用超聲水浴處理樣品，重複超聲-渦旋步驟多次，以促進蛋白的釋放和沉澱。
將樣品置於-20℃環境下沉澱4小時以上，然後離心分離。
吸出上清液，向沉澱中加入預冷的純丙酮清洗，再次離心。
重複洗滌離心至少兩次，直至徹底除去酸性的TCA以及脂溶性代謝物。
吸淨上清後，將樣品晾乾或使用真空旋轉乾燥設備乾燥。
通過上述步驟，可以有效去除樣品中的雜質，為後續的蛋白質分析或實驗提供純淨的蛋白質樣品。