胰蛋白酶（Trypsin）是一種絲氨酸蛋白水解酶，EC編號為3.4.4.4，主要從牛、羊、豬的胰臟提取。它在脊椎動物中作為消化酶起作用，在胰臟中，胰蛋白酶原被合成後分泌到胰液中，並在腸激酶或胰蛋白酶的作用下分解成為活化的胰蛋白酶。
胰蛋白酶的主要功能是作為肽鏈內切酶，能夠切斷多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基的羧基側，從而促進細胞間的蛋白質水解，使細胞離散。這種作用不僅限於消化酶，胰蛋白酶還能限制分解其他酶的前體，如糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等，從而起到活化作用。
在細胞培養中，胰蛋白酶用於分散細胞，使組織或貼壁細胞分散成單個細胞，製成細胞懸液，用於進一步的實驗。胰蛋白酶的使用需要控制適當的濃度、溫度和時間，以避免過度消化造成細胞損傷。此外，Ca2+和Mg2+以及血清、蛋白質等成分可以降低胰蛋白酶的活性，因此在配製胰酶溶液時應選用不含這些離子的培養液。
在某些特定的細胞培養環境中，如無血清培養，胰蛋白酶的使用需要特別注意，因為血清中的複雜成分可能會干擾細胞的正常生理功能。在這種情況下，可以使用如TrypLUS這樣的非動物源性胰蛋白酶替代品，它對細胞的損傷較小，且穩定性較高，可以在室溫下保存一個月或在37℃下保存一周後酶活性仍不丟失。