冰乙醇的主要作用包括：
降低混合物的冰點，作為一種常見的防凍劑。
清熱止痛、開竅醒神，並對部分細菌具有消毒殺菌作用。冰乙醇對大腸桿菌、鏈球菌、葡萄球菌以及肺炎雙球菌有抑製作用，加上酒精的消毒作用，可以起到抗炎作用。
在低溫下，冰乙醇可以降低樣品中的核酸酶活性，減少DNA雙鏈斷裂導致的損失，並促進DNA的成團析出。
廣泛用於生產葡萄酒、啤酒等飲品的製冷過程，以及冰淇淋、冷飲等的生產。
殺菌，通常採用70%~75%的乙醇進行殺菌，高濃度的乙醇能在細菌表面形成保護膜，阻止細菌進入體內。
預防褥瘡，通過促進局部血液循環，對長期臥床的患者進行按摩，預防褥瘡。
物理降溫，使用25%~50%的乙醇進行物理降溫，乙醇在揮發的過程中可以帶走體內的熱量。