分光光度法的原理基於物質對光的吸收特性,具體包括以下幾點:
物質對光的吸收具有選擇性。不同物質對不同波長的光的吸收能力不同,這種選擇性吸收是分光光度法的基礎。
朗伯-比爾定律。當一束平行單色光通過溶液時,溶液的濃度越大,光強度的減弱越顯著。這個定律是分光光度法定量分析的基礎。
操作過程。在分光光度計中,光源產生連續波長的光,照射到樣品溶液上。不同波長的光被物質吸收的程度不同,從而得到吸收光譜。
套用。分光光度法廣泛套用於化學、生物化學等領域,可用於定性和定量分析。它具有高靈敏度、操作簡便和快速等優點。
此外,分光光度計的關鍵組成部分包括光源、分光裝置(如稜鏡或光柵)和檢測器。樣品中的物質吸收特定波長的光,導致光強度減弱,通過與標準樣品比較或使用標準曲線,可以確定樣品的濃度或成分。