提取RNA的方法有多種,選擇哪種方法取決於樣品的類型和研究的目的。常見的RNA提取方法包括:
梯度密度離心法。這種方法使用不同的離心速度和溶劑來分離RNA、DNA和蛋白質。
氯仿抽提法。在細胞裂解液中加入氯仿,通過離心分離各相,從而提取RNA。
離子交換法。利用離子交換材料純化RNA,去除DNA和蛋白質。
矽膠膜法。矽膠膜可以高效地結合RNA,通過離心和洗滌後,用適當的溶劑洗脫RNA。
Trizol法。這是一種經典的RNA提取方法,利用異硫氰酸胍和苯酚混合物裂解細胞,然後分離RNA。
苯酚法。結合了Trizol法和直接使用苯酚作為溶劑的方法。
LiCl-尿素法。使用高濃度尿素變性蛋白質,然後用3mol/L LiCl沉澱RNA。
熱硼酸法和改良熱硼酸法。這些方法適用於特定類型的樣品和實驗條件。
此外,還有鹽酸胍-有機溶劑法、氯化鋰-尿素法、快速提取法等。選擇哪種方法取決於研究的具體需求、樣品的類型以及可用的實驗室設備。