氯仿在DNA提取過程中的作用主要包括以下幾點:
去除蛋白質。氯仿是一種蛋白質變性劑,能夠使蛋白質變性,從而在離心過程中與DNA分離。
加速分層。氯仿能加速有機相與水相的分層,這有助於在離心過程中將有機溶劑和含DNA的水相分開。
去除酚類物質。氯仿可以溶解酚類物質,因此在含有酚的提取體系中,氯仿能去除核酸溶液中殘留的酚,防止酚對DNA造成損傷。
去除脂溶性雜質。作為有機溶劑,氯仿還能抽提樣品中的脂溶性雜質,如油脂和脂溶性色素,進一步淨化DNA樣品。
此外,氯仿還能通過變性作用抑制RNase活性,這有助於保護RNA免受核酸酶的降解。在酚-氯仿抽提中,通常還會加入異戊醇以減少抽提過程中氣泡的產生,並幫助維持離心後各相的穩定性。