苯酚硫酸法是一種常用的多糖測定方法，其原理是利用多糖在濃硫酸作用下，先水解成單糖，並迅速脫水生成糠醛衍生物，然後與苯酚縮合成橙黃色化合物，再用紫外分光光度計測定吸光度值與糖濃度的線性關係，從而對樣品進行定量測量。這種方法操作簡單、快速且靈敏度高，不需要貴重的儀器就能進行測定。然而，苯酚硫酸法的準確性和重現性可能不佳，有時測定結果精密度較差，標準曲線的R2偏低，有色樣品結果易偏高等問題。因此，在使用苯酚硫酸法時，需要嚴格控制反應條件，如反應時間、反應溫度和苯酚的濃度等，以保證反應的順利進行，避免受到其他成分的干擾，以保證檢測結果的準確性。
此外，苯酚硫酸法還可以用於檢查機體是否存在幽門螺桿菌感染，但這是一種侵入性試驗，臨床上已較少使用。
需要注意的是，另一種名為「苯酚-醋酸試驗」的檢測方法與苯酚硫酸法不同，主要用於檢查機體是否存在幽門螺桿菌感染，不可混淆。