過柱子通常指的是在化學實驗中,使用柱色譜法(Column Chromatography)分離和純化混合物樣品的過程。這種方法主要用於分離和純化那些不適合使用其他色譜技術(如HPLC)的樣品。在過柱子時,常用的材料是矽膠,其目數(顆粒大小)會影響分離效果。高目數的矽膠顆粒更細,能提供更好的分離效果,但同時也會使樣品在柱子上的移動更慢,需要更大的壓力或更長的時間。
過柱子的步驟包括:
裝柱:首先在柱子底部塞入棉花,以防止石英砂和矽膠漏出。然後倒入石英砂,再倒入矽膠,確保柱子上下粗細一致。
上樣:將樣品小心地沿著柱壁繞圈加入,儘量避免破壞矽膠表面。
洗脫:使用洗脫劑(通常是溶劑)通過高壓氣體或手動擠壓的方式加壓,使樣品在矽膠柱上移動並分離。洗脫劑的極性會影響分離效果,極性較低的洗脫劑通常用於柱層析。對於極性跨度較大的物質,可以採用梯度洗脫的方法,逐漸增加溶劑的極性。
收集:不同成分會根據其在矽膠上的吸附強度不同,以不同的速度移動,最終在不同的位置被收集,從而實現分離。
在選擇洗脫劑時,應優先考慮使用毒性較小的溶劑,並在可能的情況下回收使用洗脫劑,以節約經費並減少環境污染。此外,裝柱子的技巧對層析分離效果有重要影響,常用的裝柱方法包括濕法裝柱和乾法裝柱。