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酚氯仿的作用

酚和氯仿在生物化學實驗中常用作蛋白質變性的試劑,它們的作用如下:

酚。酚是一種強烈的蛋白質變性劑,能有效使蛋白質變性。然而,酚與水有一定程度的互溶性,這意味著在使用過程中會損失一些水相中的DNA。

氯仿。氯仿則克服了酚的這一缺點,因為它不與水互溶,可以加速有機相與液相的分層。在抽提過程中,氯仿還能幫助去除核酸溶液中殘留的酚。

此外,酚和氯仿的結合使用還有助於分相,使離心後的上層含DNA的水相、中間的變性蛋白相及下層有機溶劑相維持穩定,從而更容易分離各種成分。