勵志

勵志人生知識庫

酵母菌的染色方法

酵母菌的染色方法主要包括以下幾種:

核DNA和線粒體DNA染色。將酵母細胞培養至約107細胞/ml,離心收集後懸浮在70%乙醇中固定5分鐘以上,用去離子水洗滌2次,然後將細胞懸浮在含有50ng/ml的4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)的封固劑中,使用紫外濾片觀察。

線粒體染色。培養酵母細胞至約107細胞/ml,加入100ng/ml的3,3』-二已基噁羰花青碘化物(DiOC6),用乙醇將1mg/ml母液稀釋至1/104,培養5分鐘以上,使用螢光素濾片觀察。

液泡染色。將酵母細胞培養至約107細胞/ml,離心收集後懸浮在含有50mmol/L檸檬酸鈉(pH4.0)的YPD中,加入CDCFDA(羧基-2』,7』-二氯-螢光素雙乙酸鹽)至終濃度為10μmol/L,保溫10分鐘以上,使用螢光濾片觀察。

牙痕和幾丁質染色。培養酵母細胞至約107細胞/ml,加入100μg/ml的Calcofluor(螢光發光劑28),用水將1mg/ml母液稀釋至1/10,培養5分鐘以上,使用紫外濾片觀察。

以上方法可以用於觀察酵母菌的不同結構和特性。